1. A GYÓGYSZER MEGNEVEZÉSE

LEUCO-SCINT készlet radioaktív gyógyszerkészítményhez

2. Minőségi és mennyiségi összetétel

LEUCO-SCINT jelző ampulla összetétele:

1 ampulla tartalma:

Hatóanyag:

d,l-Exametazim 0,18 mg

A segédanyagok teljes listáját lásd a 6.1 pontban.

3. Gyógyszerforma

Készlet radioaktív gyógyszerkészítményhez

Radiogyógyszer készlet technécium Tc-99m d,l-Exametazim készítéséhez.

A Leuco-Scint készlet tartalma:

Por oldatos injekcióhoz.

Steril, pirogénmentes liofilizált fehér por nitrogén atmoszférában lezárva, amelyet oxidálószermentes nátrium-pertechnetát Tc-99m injekcióval (Ph. Eur.) jelezni kell ahhoz, hogy diagnosztikus vizsgálatot lehessen végezni

A készlet tartalmaz még steril, pirogénmentes antikoaguláns oldatot és steril, pirogénmentes szedimentáló ágens oldatot.

4. Klinikai Jellemzők

4.1 Terápiás javallatok

Ez a gyógyszer kizárólag diagnosztikai célra alkalmazható.

A betegtől levett vérből aszeptikus körülmények között szeparált fehérvérsejtek ^99mTc-pertechnetát steril oldattal történő jelzését követően és a betegbe történő visszainjektálása után a következő vizsgálatokra alkalmas:

A szervezetben zajló gyulladásos folyamatok kimutatása (fehérvérsejt migráció alapján)

• bakteriális fertőzés

• tályog

• a bélrendszer, vagy a csontok, ízületek gyulladásos elváltozásai esetén

4.2 Adagolás és alkalmazás

Adagolás: Egy üveg liofilizátum jelzéséhez 950-1000 MBq steril ^99mTc-Nátrium-pertechnetát oldatot használunk 1,5 ml térfogatban.

Alkalmazás módja: intravénásan, a szedimentálódott fehérvérsejtek jelzését követő 30 percen

belül. A felvétel javasolt időpontja: az injektálást követő 1., 2., 3., és 4 . órában.

Javasolt aktivitás: 200-250 MBq

3. Ellenjavallatok

Ismert ellenjavallatok nincsenek.

3. Különleges figyelmeztetések és az alkalmazással kapcsolatos óvintézkedések

Csak megfelelően szakképzett személy foglalkozhat radiofarmakonok jelzésével. Az ampulla tartalmát csak ^99mTc-LEUCO-SCINT előállítására szabad felhasználni és tilos a betegnek beadni anélkül, hogy az izotópot nem adták hozzá.

Csak olyan ^99mTc generátorból származó elutumot szabad felhasználni, amelyet 24 órán belül már megfejtek, illetve 2 óránál nem hosszabb időpontban történt az elutum fejése.

A radioaktív gyógyszereket nagyon gondosan, a biztonsági előírásokat betartva szabad használni, hogy így csökkentsük a klinikai személyzet sugárterhelését.

A kit tartalma a felhasználás előtt nem radioaktív, de a ^99mTc-nátrium pertechnetát steril injekció hozzáadása után a megfelelő sugárvédelmi eszközök használata kötelező.

A radiogyógyszer készlet steril, pirogénmentes, ezért követni kell a szigorúan aszeptikus eljárás előírásait.

A páciensnek a készítmény beadása előtt és után nagyon sok folyadékot kell innia, ezzel elősegítve a folyadék kiválasztását, mellyel a sugárdózis csökkenthető.

A fehérvérsejtek szeparálása és jelzése aszeptikus körülmények között történjen. A szedimentálódott fehérvérsejtek felületéről a lehető legteljesebb mértékben el kell távolítani a plazmát, mert az erősen csökkenti a fehérvérsejtek jelzési hatásfokát. A jelzést azonnal el kell végezni és a jelzett leukocitákat 30 percen belül reinjektálni.

3. Gyógyszerkölcsönhatások és egyéb interakciók

Más gyógyszerekkel való kölcsönhatásokról eddig nem számoltak be.

3. Terhesség és szoptatás

Reprodukciós korban lévő nőknél végzett vizsgálatok:

Ha reprodukciós korban lévő nőknél kell alkalmazni a radiofarmakont, mindig tájékozódni kell az esetleges terhességről. Ezeket a nőket mindig terhesnek kell tekinteni, ha kimarad egy menstruációs ciklus mindaddig, míg az ellenkezője be nem bizonyul. Ha bizonytalan a helyzet, akkor a beteget minimális expozíciónak szabad csak kitenni, annak érdekében, hogy megfelelő klinikai információhoz jussunk. Egyéb vizsgálati módszerek alkalmazását, melyek nem kapcsolatosak az ionizáló sugárzással, ezeknél a nőknél mindig mérlegelni kell.

Terhesség

Humán terhesség esetén való alkalmazásra nincsenek adatok. Nem végeztek állatkísérleteket sem ezen a téren. Terhes nőkön végzett izotópdiagnosztikai vizsgálatok során a magzatot is éri az adott sugárdózis. Ezért csak olyan sürgős vizsgálatot lehet elvégezni terhesség alatt, amelynél a vizsgálatból származó információ értéke meghaladja az anyát és a magzatot érhető károsodás kockázatát.

Szoptatás

Mielőtt szoptatós anyának radioaktív gyógyszert adnánk, mérlegelni kell, hogy az elvégzendő vizsgálatot a szoptatás utáni időszakra lehet-e halasztani, vagy pedig a legalkalmasabb radiofarmakont kell kiválasztani, gondolva arra, hogy a radioaktív anyag kiválasztódik az anyatejbe. Ha a radioaktív gyógyszer használata mégis szükségszerű, a szoptatást 12 órára fel kell függeszteni, és a lefejt anyatejet nem szabad felhasználni. A szoptatást abban az esetben lehet elkezdeni, ha az anyatejben lévő radioaktivitás szintje nem eredményez a magzat számára 1 mSv-nél nagyobb sugárdózist.

3. A készítmény hatásai a gépjárművezetéshez és gépek kezeléséhez szükséges képességekre

A radioaktív gyógyszer alkalmazása nem befolyásolja a beteg gépjárművezetési és gépkezelési tevékenységét.

3. Nemkívánatos hatások, mellékhatások

Nagyon kevés esetben észleltek enyhe csalánkiütésszerű túlérzékenységi reakciót a nem stabilizált technetium[99^mTc] exametazim készítmény intravénás adagolását követően.

Minden egyes vizsgálat során a beteg sugárterhelésnek van kitéve, ez a valószínűsített előny alapján indokolt kell legyen. Az aktivitás mennyiségének olyannak kell lenni, hogy a sugárdózis az elérhető legkevesebb legyen, szemmel tartva az elérni kívánt diagnózishoz szükséges mennyiséget.

Az ionizációs sugárzásnak való kitétel összefüggésben áll rákindukcióval és potenciális örökletes hibák kialakulásával. A diagnosztizált nukleáris medicina vizsgálatok során a jelenlegi bizonyítékok azt sugallják, hogy ilyen mellékhatások ritkán jelentkeznek radiofarmakon kis akivitása miatt.

Minden betegnél a valószínű hasznos információ alapján kell mérlegelni az ionizáló sugárzásból eredő expozíciót. A beadott aktivitásnak annyinak kell lennie, hogy az abból eredő sugárdózis minél alacsonyabb legyen, szem előtt tartva az elérhető diagnosztikai eredményt.

A legtöbb diagnosztikus vizsgálathoz, amelyben nukleáris eljárást használnak, a sugárterhelés (EDE) kevesebb, mint 20 mSv. Ennél magasabb dózis indokolt lehet néhány klinikai körülménynél.

3. Túladagolás

A LEUCO-SCINT kittel végzett állatkísérletek eredményei szerint túladagolás veszélye nem áll fenn.

Abban az esetben, ha radiációs túladagolás történne, a beteg által elnyelt dózis csökkenthető a vizelet és székletürítés gyakoriságának fokozásával.

4. FARMAKOLÓGIAI tulajdonságok

1. Farmakodinámiás tulajdonságok

Farmakoterápiás csoport: Radioaktív diagnosztikumok

ATC kód: V09AA02

A ^99mTc-LEUCO-SCINT diagnosztikai célra alkalmazott dózisánál nincs farmakodinámiás hatás.

2. Farmakokinetikai tulajdonságok

A LEUCO-SCINT készlet hatóanyaga a d,l-Exametazim ligandum lipofil anyag, amely neutrális komplexet képez a ^99mTc-mal.

A lipofil komponens nagyon gyorsan átjut a sejtek membránján, azt követően pedig egy sejten belüli kölcsönhatás következtében hidrofil átalakuláson megy keresztül. Az így keletkezett hidrofil komplex már nem tud kidiffundálni a sejtekből a membránon keresztül („csapdába esik”), nem jut vissza a véráramba.

[99^mTc]-technéciummal jelzett leukuciták a májba (5 percen belül), a lépbe (40 percen belül), valamint a vérkeringésbe kerülnek. Ez utóbbi mintegy 50%-át veszi fel a jelzett leukocitáknak.Körölbelül 37%-a a jelzett sejteknek 40 perccel az injektálás után visszanyerhető a vérkeringésből. [99^mTc]-technécium aktivitása lassan kiürül a sejtekből és kiválasztódik részben a veséken, részben a májon keresztül az epehólyagba. Ezek a belek radioaktivitásának növekedését eredményezik.

5.3 A preklinikai biztonságossági vizsgálatok eredményei

A hagyományos – farmakológiai biztonságossági, ismételt dózistoxicitási, genotoxicitási, karcinogenitási, reprodukciós toxicitási – vizsgálatokból származó nem klinikai jellegű adatok azt igazolták, hogy a készítmény nem jelent különleges veszélyt az emberre.

A ^99mTc-LEUCO-SCINT toxicitás vizsgálata során megállapítottuk, hogy egyszeri adás után toxikus tünetek nem fordulnak elő, még ismételt dózisú toxicitás vizsgálatnál a maximális humán dózis sokszoros adagja sem okozott elváltozást patkányokon.

A preklinikai vizsgálatok során végzett szövettani eredmények sem mutattak kóros elváltozásokat laboratóriumi kísérleti állatokon.

A gyógyszer mutagén, teratogén és karcinogén hatásairól az irodalomban sem számoltak be.

5. GYógyszerészeti jellemzők

1. Segédanyagok felsorolása

Ón-klorid-dihidrát

Nátrium-pirofoszfát-dekahidrát.

2. Inkompatibilitások

A nátrium pertechnetát ^99mTc steril injekcióval történő jelölési reakció függ az ónszint redukált állapotban való fenntartásától. Ezért oxidálószereket tartalmazó nátrium pertechnetát Tc-99m injekciót nem szabad alkalmazni.

3. Felhasználhatósági időtartam

A készlet a gyártástól számított 1 évig, a készlet dobozán feltüntetett időpontig használható fel.

A jelzett fehérvérsejteket, a jelzést követően azonnal, de minimum 30 percen belül reinjektálni kell.

A jelzett készítményt a jelzés időpontjától számított 30 percen belül fel kell használni.

4. Különleges tárolási előírások

A készlet a fénytől való védelem érdekében az eredeti csomagolásban és 2-8 ^oC-on tárolandó. Oxidálószerektől védve kell tartani.

A jelzett termék legfeljebb 25 ^oC-on, vagy ez alatti hőmérsékleten, fénytől védve tárolandó.

A jelzett termék tárolása során a hatályos védekezési és biztonsági előírásokat be kell tartani.

A készletben lévő üveg tartalma csak a ^99mTc-technécium jelzett injekció előállítására használható fel az alkalmazási előírásnak megfelelően.

A radioaktív gyógyszert csak olyan orvos, vagy megfelelően képzett személy használhatja fel, akinek megfelelő képzettsége és tapasztalata van a radionuklidok kezelésében és a hatályos védekezési és biztonsági előírások betartásában.

5. Csomagolás típusa és kiszerelése

3 üveg LEUCO-SCINT

nitrogén atmoszférában lezárt steril, pirogénmentes liofilizátum 6 és 15 ml-es, 1-es típusú boroszilikát üvegből (Ph. Eur.) készült injekciós üvegben, gumidugóval és rollnizott aluminium kupakkal lezárva.

3 üveg ACD-A

antikoaguláns, steril, pirogénmentes 10 ml üvegenként.

3 üveg Plasmasteril (plasmaexpander)

szedimentáló ágens, steril, pirogénmentes 15 ml üvegenként.

6. A megsemmisítésre vonatkozó különleges óvintézkedések

Bármilyen fel nem használt készítmény, illetve hulladékanyag megsemmisítését a helyi előírások szerint kell végrehajtani.

Megjegyzés:

Osztályozás: II./3 csoport

Korlátozott érvényű orvosi rendelvényhez kötött, az egészségügyről szóló 1997. évi CLIV. Törvény 3. §-ának ga) pontja szerinti rendelőintézeti járóbeteg-szakellátást vagy fekvőbeteg-szakellátást nyújtó szolgáltatók által biztosított körülmények között alkalmazható gyógyszer (I).

5. A FORGALOMBA HOZATALI ENGEDÉLY JOGOSULTJA

Neve és címe: MEDI-RADIOPHARMA Kft.

H-2003 Érd

Szamos u. 10-12.

Tel.: 06-23-521-261

Fax: 06 23-521 260

E-mail: mediradiopharma-kft @mediradiopharma.hu

5. A FORGALOMBA HOZATALI ENGEDÉLY SZÁMA(I)

OGYI-T-8734/01

5. A FORGALOMBA HOZATALI ENGEDÉLY ELső KIADÁSÁNAK/MEGÚJÍTÁSÁNAK DÁTUMA

Az első engedélyezés időpontja: 1992. 07. 16.

Az engedély megújításának időpontja: 2003. 01. 14.

5. A szöveg ellenőrzésének dátuma

2008. december 12.

11. VÁRHATÓ SUGÁRTERHELÉS

A [99^mTc]-technécium gamma sugárzás kibocsátással 140 keV energiával bomlik, 6 óra felezési idővel stabil technecium-99 re.

A ^99mTc-HM-PAO intravénás alkalmazása esetén a 70 kg testsúlyú beteg szerveit, illetve szöveteit ért sugárdózis értékeket az alábbi táblázatok mutatják be.

Felnőtt és gyermek esetében

Elnyelt dózis
Szervek	Felnőtt mGy/MBq	15 éves mGy/MBq	10 éves mGy/MBq	5 éves mGy/MBq	1 éves mGy/MBq	újszülött mGy/MBq
mellékvese	9.86E-03	1.22E-02	1.75E-02	2.36E-02	3.73E-02	7.46E-02
agy	2.09E-03	2.67E-03	3.94E-03	6.25E-03	1.11E-02	2.53E-02
mell	2.31E-03	2.83E-03	4.54E-03	6.99E-03	1.21E-02	2.75E-02
epehólyag fala	9.50E-03	1.14E-02	1.71E-02	2.70E-02	3.88E-02	7.90E-02
felsővastagbél fal	4.10E-03	5.28E-03	8.07E-03	1.10E-02	1.80E-02	3.40E-02
alsóvastagbél fal	5.21E-03	6.56E-03	9.52E-03	1.57E-02	2.45E-02	4.89E-02
vékonybél	5.04E-03	6.24E-03	1.48E-02	1.40E-02	2.23E-02	4.54E-02
gyomor	8.55E-03	1.01E-02	1.03E-02	2.08E-02	3.24E-02	6.42E-02
szív fala	5.37E-03	6.54E-03	9.46E-03	1.34E-02	2.24E-02	4.45E-02
vese	9.50E-03	1.16E-02	1.71E-02	2.39E-02	3.63E-02	7.00E-02
máj	2.40E-02	3.08E-02	4.52E-02	6.31E-02	1.13E-01	2.41E-01
tüdő	4.98E-03	6.36E-03	8.89E-03	1.29E-02	2.16E-02	4.41E-02
izom	3.43E-03	4.30E-03	6.26E-03	9.24E-03	1.58E-02	3.44E-02
petefészek	3.98E-03	4.96E-03	7.08E-03	1.00E-02	1.51E-02	2.95E-02
hasnyálmirigy	1.42E-02	1.73E-02	2.46E-02	3.54E-02	5.44E-02	1.04E-01
vöröscsontvelő	1.85E-02	2.09E-02	3.30E-02	6.09E-02	1.21E-01	3.96E-01
csontfelszín	1.41E-02	1.58E-02	2.52E-02	4.08E-02	6.01E-02	1.18E-01
bőr	1.86E-03	2.25E-03	3.58E-03	5.71E-03	1.03E-02	2.40E-02
lép	1.57E-01	2.22E-01	3.34E-01	5.12E-01	9.11E-01	2.36E+00
here	1.73E-03	2.25E-03	3.43E-03	5.43E-03	9.50E-03	2.18E-02
csecsemőmirigy	2.99E-03	3.64E-03	5.10E-03	7.58E-03	1.30E-02	2.77E-02
pajzsmirigy	2.40E-03	3.00E-03	4.53E-03	7.16E-03	1.24E-02	2.74E-02
hólyag fala	2.80E-03	3.81E-03	5.71E-03	8.44E-03	1.40E-02	2.84E-02
méh	3.36E-03	4.18E-03	8.22E-03	1.20E-02	1.94E-02	2.90E-02
egésztest	5.03E-03	6.23E-03	9.43E-03	1.42E-02	2.41E-02	5.38E-02
EDE (mSv/MBq)	1.75E-02	2.31E-02	5.36E-02	5.36E-02	9.41E-02	2.40E-01

A dózis kalkuláció a standard MIRD módszerrel (MIRD Pamphlet No.1 Society of Nuclear Medicine, 1976) történt. Az Effektív Dózisegyenérték (EDE) értékének megadása az ICRP 53-ban leírtak alapján történt (Ann. ICRP 18 (1-4), 1988).

Terhes nők esetében

Elnyelt dózis
Szervek	Nő mGy/MBq	3 hónapos mGy/MBq	6 hónapos mGy/MBq	9 hónapos mGy/MBq
mellékvese	1.20E-02	1.20E-02	1.20E-02	1.20E-02
agy	2.55E-03	2.57E-03	2.42E-03	2.43E-03
mell	2.77E-03	2.78E-03	2.84E-03	2.84E-03
epehólyag fala	1.13E-02	1.11E-02	1.13E-02	1.11E-03
felsővastagbél fal	4.83E-03	4.55E-03	3.26E-03	3.00E-03
alsóvastagbél fal	6.16E-03	5.70E-03	3.69E-03	2.69E-03
vékonybél	5.71E-03	5.60E-03	3.33E-03	3.23E-03
gyomor	9.84E-03	9.60E-03	6.09E-03	1.15E-02
szív fala	6.42E-03	6.42E-03	1.01E-02	1.00E-02
vese	1.12E-02	1.12E-02	6.23E-03	6.23E-03
máj	3.05E-02	3.04E-02	1.10E-02	1.09E-02
tüdő	6.29E-03	6.30E-03	3.05E-02	3.05E-02
izom	4.08E-03	4.05E-03	5.90E-03	5.92E-03
petefészek	4.41E-03	4.03E-03	3.94E-03	3.74E-03
hasnyálmirigy	1.71E-02	1.70E-03	4.88E-03	4.32E-03
vöröscsontvelő	1.72E-03	1.72E-03	1.69E-02	1.72E-03
csontfelszín	1.38E-02	1.37E-02	1.37E-02	1.37E-02
bőr	2.19E-03	2.19E-03	2.14E-03	2.14E-03
lép	1.86E-01	1.86E-01	1.86E-01	1.86E-01
here
csecsemőmirigy	3.48E-03	3.50E-03	3.35E-03	3.35E-03
pajzsmirigy	2.58E-03	2.60E-03	2.57E-03	2.56E-03
hólyag fala	3.35E-03	2.91E-03	2.12E-03	2.09E-03
méh	3.72E-03	2.87E-03	2.96E-03	3.01E-03
magzat		2.80E-03	2.83E-03	2.68E-03
placenta			2.75E-03	2.26E-03
egésztest	5.93E-03	5.90E-03	5.68E-03	5.62E-03
edE (mSv/MBq)	2.03E-02	2.02E-02	2.03E-02	2.02E-02

A dózis kalkuláció a standard MIRD módszerrel (MIRD Pamphlet No.1 Society of Nuclear Medicine, 1976) történt. Az Effektív Dózisegyenérték (EDE) értékének megadása az ICRP 53-ban leírtak alapján történt (Ann. ICRP 18 (1-4), 1988).

12. RADIOAKTÍV GYÓGYSZEREK ELKÉSZÍTÉSÉRE VONATKOZÓ ÚTMUTATÁSOK

A minőségellenőrzés célja egyrészt a ^99mTc-Exametazim lipofil komplex mennyiségének, valamint a radioaktív szennyezők, azaz a szabad ^99mTc-pertechnetát, a redukált és hidrolizált ^99mTc és a hidrofil ^99mTc-HM-PAO komplex mennyiségének meghatározása, másrészt a sejtjelzés hatásfokának ellenőrzése. A lipofil ^99mTc-HM-PAO komplex mennyisége 30 percen belül nem lehet kevesebb, mint 80%, valamint a radioaktív szennyezők összmennyisége nem haladhatja meg a 20%-ot. A leukociták jelzési hatásfoka, a jelzést követő 30 percen belül a hozzáadott 99m-Tc-HM-PAO összaktivitásának százalékában 50-55%. A reszuszpendált sejtek aktivitásának több mint 90%-a sejtekhez kötött aktivitás.

Leukocita szeparálás

1. 4 db 2 ml ACD-A-t és 3 ml Plasmasterilt tartalmazó 20 ml-es műanyag fecskendőbe vastag vérvételi tűvel egyenként 15-15 ml, összesen 60 ml vénás vért veszünk a betegtől.

2. A dugattyú továbbhúzásával és a fecskendő óvatos átforgatásával a benne lévő oldatokkal a vért óvatosan elegyítjük, majd főzőpohárba téve, a fecskendőt dugattyús felére állítva hagyjuk szobahőn szedimentálódni. Addig várunk, amíg a leüllepedett vörösvértestek és a felülúszó aránya kb. fele-fele nem lesz (30 perc).

3. A felülúszót (trombocitában, leukocitában gazdag plazma, mely kevés vörösvértestet tartalmaz) egy szögben meghajlított tűn át (18 G 1 1/2) óvatosan steril centrifugacsőbe nyomjuk, és 150 g-n 10 percig centrifugáljuk.

4. A leüllepedett sejtekről a felülúszót (trombocitákban gazdag plazma) steril Pasteur pipettával eltávolítjuk, és félretesszük a jelzett sejtek mosásához, illetve a reinjektáláshoz. A szedimentálódott fehérvérsejtek felületéről a lehető legteljesebb mértékben el kell távolítani a plazmát, mert az erősen csökkenti a fehérvérsejtek jelzési hatásfokát.

5. A jelzést azonnal el kell végezni és a jelzett leukocitákat 30 percen belül reinjektálni.

LEUCO-SCINT jelzése 99m-Tc-mal

1. Helyezzük a HM-PAO tartalmú ampullát ólomkonténerbe és injektáljunk bele 1,5 ml, fiziológiás sóval hígított 950-1000 MBq ^99mTc-Na-pertechnetátot, majd a fecskendőbe szívjunk vissza 1,5 ml levegőt a túlnyomás elkerülése végett. A jelzéshez használt izotóp friss legyen, lehetőleg a generátorból való levételt követő 2 órán belül használjuk fel.

2. Fordítsuk fel néhányszor az ampullát a teljes oldódás érdekében és hagyjuk szobahőn jelződni 10 percig.

A leukocita jelzése 99m-Tc-HM-PAO-val

1. A szeparált plazmamentes leukocitákhoz hozzáadjuk óvatos keveréssel az előzőekben leírt módon jelzett 99m-Tc-HM-PAO-t és szobahőn inkubáljuk 10 percig.

2. Hozzáadunk 3 ml előzőleg félretett felülúszót és centrifugáljuk 150 g-vel 10 percig.

3. A centrifugálás után szétválasztjuk a sejtet a felülúszótól, a sejtre ismét 3 ml felülúszót téve reszuszpendáljuk azt, majd mérjük az aktivitását.

A leukociták jelzési hatásfoka a hozzáadott 99m-Tc-HM-PAO összaktivitásának százalékában 50-55% a jelzést követ 30 percen belül.

A reszuszpendált sejtek aktivitásának több mint 90%-a sejtekhez kötött aktivitás.

Minőségellenőrzés

A minőségellenőrzés során ellenőrizni kell:

1. A szeparált fehérvérsejtek életképességét

2. A fehérvérsejtek jelzéséhez használt HM-PAO-t tartalmazó LEUCO-SCINT készlet radiokémiai tisztaságát

A leukociták életképességének vizsgálata:

A leukociták életképessége tripán-kék(3,3,-3,3-dimetil-4,4,-bifenilén)bisz(5-amino-4-hidroxi-2,7-naftalin-szulfonsav tetranátrium sója) festékkel vizsgálható a következő módon:

1. A tripán-kék festék 0,2%-os desztillált vizes oldatát 4:1 arányban elegyítjük 4,25%-os natrium-klorid odattal.

2. Az így előállított oldatból 0,45 ml-t adunk a leukocita szuszpenzió 0,05 ml-es térfogatához, összerázzuk és azonnal Bürker-kamrába töltjük.

3. A festékoldat passzívan átdiffundál az elpusztult sejtek sejthártyáján, minek következtében azok kékesen elszíneződnek, szemben a natív élő sejtekkel.

4. A sejtek viabilitását a kékre színeződött, illetve natív sejtek %-os arányában adjuk meg. A fenti módszer alkalmazásával a leukociták több mint 90%-nak kell változatlan viabilitást mutatnia.

LEUCO-SCINT készlet minőségellenőrzése

Módszer:

I. oldószer extrakciós módszer

II. Felszálló vékonyréteg kromatográfia

I. oldószer extrakciós módszer

A jelzés ellenőrzését (radiokémiai tisztaság) szerves oldószer extrakciós módszerrel végezzük. Ezzel a módszerrel a lipofil ^99mTc-LEUCO-SCINT mennyiségét határozzuk meg az összaktivitás %-ában kifejezve.

Anyagok és eszközök:

1. fiziológiás sóoldat

2. kloroform

3. Vortex mixer

4. dózis kalibrátor

5. extrakciós folyadék: 3 ml kloroform + 2.9 ml fiziológiás sóoldat.

6. üres ampullák a vizes és szerves oldószeres fázis szétválasztásához

7. fecskendő, tű, olló, csipesz

Kivitelezés:

1. A ^99mTc-LEUCO-SCINT oldatból mérjünk 0,1 ml-t az extrakciós folyadékhoz.

2. Kevertessük az ampullát Vortex keverővel, majd hagyjuk állni 1-2 percig, hogy a fázisok szétváljanak

3. Szívjuk le a felül lévő vizes fázist fecskendővel egy másik ampullába.

4. A két fázis aktivitását határozzuk meg aktivitásmérő készülékkel. A lipofil ^99mTc-MIBI komplex az alsó kloroformos fázisban található. A szabad pertechnetátot, a vizes fázisban találjuk.

5. A lipofil tartalom kiszámítása a következő képlet alapján történik:

A lipofil ^99mTc-HM-PAO komplex mennyisége 30 percen belül nem lehet kevesebb, mint 80%, valamint a radioaktív szennyezők összmennyisége nem haladhatja meg a 20%-ot.

II. Felszálló vékonyréteg kromatográfia

Három féle radiokémiai szennyeződés lehet jelen az elkészített technetium-[99^mTc] exametazim injekcióban. Ezek a következők: másodlagos technetium-[99^mTc] exametazim komplex, szabad pertechnetát[99^mTc] és redukált-hidrolizált technetium-[99^mTc]. Két kromatográfiás rendszer kiértékelése szükséges ahhoz, hogy meghatározzuk az injekció radiokémiai tisztaságát.

Kivitelezés:

1. A mintákat tűvel helyezzük kb. 2,5 cm-re két TLC (szilikagéllel átitatott üveg rostszál kromatográfiás lemez) (2 cm x 20cm) kromatográfiás lemez aljától.

2. A lemezeket rögtön behelyezzük két előre elkészített felszálló kromatográfiás kifejlesztő edénybe.

3. Az egyikben metil-etil-keton (MEK), míg a másikban 0.9 %-os NaCl oldat van (1cm mély, friss oldatok). 15 cm kifejlesztés után a kromatogrammokat kiszedjük, megjelöljük a kifejlesztés határát, megszárítjuk és megmérjük az aktivitás eloszlást megfelelő műszerrel.

A kromatogram kiértékelése:

1-es Rendszer ITLC: MEK

A másodlagos technetium [99^mTc]-exametazim komplex és a redukált-hidrolizált-technetium[99^mTc]) a starton marad, Rf.: 0.0-0.1

A lipofil technetium[99^mTc] exametazim komplex és a pertechnetát[99^mTc] a frontra Rf.: 0.8-1.0 vándorol.

2-es Rendszer ITLC: 0,9%-os NaCl oldat

A lipofil technetium [99^mTc] exametazim komplex és a másodlagos technetium[99^mTc] exametazim komplex, valamint a redukált-hidrolizált-technetium[99^mTc] starton marad. A pertechnetát [99^mTc] a frontra Rf.: 0.8-1.0 vándorol.

Számítsuk ki mindkét aktivitást az össz aktivitás %-ban kifejezve amit a másodlagos technetium[99^mTc] exametazim komplex és a redukált-hidrolizált-technetium[99^mTc]-ból származik az 1-es rendszerből (A%).

Határozzuk meg az aktivitását a pertechnetát[99^mTc] -nek a 2-es rendszerből.

A radiokémiai tisztaságot (a lipofil technetium-[99^mTc] exametazim komplex %-a) a következő képlet adja:

100-(A%+B%),

ahol: A% jelenti a másodlagos technetium

[99^mTc] exametazim komplex és a

redukált-hidrolizált-technetium[99^mTc] értékét együttesen.

B% jelenti a pertechnetát [99^mTc] mennyiségét.

30 percen belül legkevesebb 80%-os radiokémiai tisztaság várható a stabilizált termék elkészítése után.